定氮儀原理:蛋白質(zhì)是含氮的有機化合物。將食物加熱、消化,用硫酸和催化劑將蛋白質(zhì)分解,分解后的氨與硫酸結合形成硫酸銨。然后堿化蒸餾使氨游離,用硼酸吸收,然后用硫酸或鹽酸標準溶液,根據酸的消耗量乘以換算系數,即為蛋白質(zhì)含量。
上海雷磁定氮儀操作步驟:
一、消化
1、準備6個(gè)凱氏燒瓶,標號。1、2、3號燒瓶中分別加入適當濃度的蛋白溶液1.0mL,樣品要加到燒瓶底部,切勿沾在瓶口及瓶頸上。再依次加入硫酸鉀-硫酸銅接觸劑0.3g,濃硫酸2.0mL,30%過(guò)氧化氫1.0mL。4、5、6號燒瓶作為空白對照,用以測定試劑中可能含有的微量含氮物質(zhì),對樣品測定進(jìn)行校正。4、5、6號燒瓶中加入蒸餾水1.0mL代替樣液,其余所加試劑與1、2、3號燒瓶相同。
2、將加好試劑的各燒瓶放置消化架上,接好抽氣裝置。先用微火加熱煮沸,此時(shí)燒瓶?jì)任镔|(zhì)炭化變黑,并產(chǎn)生大量泡沫,務(wù)必注意防止氣泡沖出管口。待泡沫消失停止產(chǎn)生后,加大火力,保持瓶?jì)纫后w微沸,至溶液澄清后,再繼續加熱使消化液微沸15min。在消化過(guò)程中要隨時(shí)轉動(dòng)燒瓶,以使內壁粘著(zhù)物質(zhì)均能流入底部,以保證樣品完全消化。消化時(shí)放出的氣體內含SO2,具有強烈刺激性,因此自始自終應打開(kāi)抽水泵將氣體抽入自來(lái)水排出。整個(gè)消化過(guò)程均應在通風(fēng)櫥中進(jìn)行。消化完全后,關(guān)閉火焰,使燒瓶冷卻至室溫。
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